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附 录 B
产品微生物检测方法
B.5 金黄色葡萄球菌检测方法
B.5.1 操作步骤
B.5.1.1 增菌培养：取样液 5.0 mL，加入到 50 mL SCDLP 培养液中，充分混匀，置 36 ℃±1 ℃ 培养18 h～24 h。
B.5.1.2 分离培养：自上述增菌悬液中取 1～2 接种环，划线接种 Baird Parker 培养基（）或血琼脂培养基，置 36 ℃±1 ℃ 培养 24 h～48 h。在 Baird Parker 培养基上为圆形，光滑，凸起，湿润，直径为2.0 mm～3.0 mm,颜色呈灰色到黑色，周围为一混浊带，在其外层有一透明带，用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶尔会遇到非脂肪溶解的类似菌落，但无混浊带及透明带。在血琼脂平皿上典型菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。
B.5.1.3 染色镜检：挑取典型菌落，涂片作革兰染色镜检，金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌，排列成葡萄状，无芽孢与荚膜。镜检符合上列情况，还需进行甘露醇发酵试验和血浆凝固酶试验。
B.5.1.4 甘露醇发酵试验：取血琼脂平皿上典型菌落接种甘露醇培养液，置 36 ℃±1 ℃ 培养 24 h，发酵甘露醇产酸者为阳性。
B.5.1.5 血浆凝固酶试验（试管法）：吸取 1:4 新鲜血浆或冻干血浆生理盐水溶液 0.5 mL，放小试管中，加入等量待检菌 24 h 肉汤培养物 0.5 mL，混匀，放 36 ℃±1 ℃ 温箱或水浴中，每 30 min 观察一次，24 h 之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各 0.5 mL 作为阳性与阴性对照。
B.5.1.6 其他检验：使用生化鉴定试剂或生化鉴定卡的，依据商品试剂说明书对可疑菌落进行鉴定。
B.5.2 结果报告
凡在琼脂平皿上有可疑菌落生长，镜检为革兰阳性呈葡萄状排列的球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。
以下内容转自“食品接触材料科学”公众号，原标题《造纸化学品中氯.丙.醇的测试方法团标发布》，此公众由我们总部FCM实验室运营。
近日，由IQTC提出并推动立项的团体标准 T/CNFIA 206-2024 《造纸化学品中氯.丙.醇含量的测定 气相色谱-质谱法》已经由食品工业协会正式发布。标准已于2024年7月14日起正式实施。标准文本欢迎索阅。
立项背景
GB 4806.8-2022《食品安全国家标准 食品接触用纸和纸板材料及制品》对食品接触用纸制品中氯.丙.醇的水提取量设定了严格的要求，现有研究显示造纸化学品可能是其主要来源之一，因此控制其含量成为生产企业亟需解决的重要任务。
由IQTC牵头起草的GB 4806.8-2022《食品安全国家标准 食品接触用纸和纸板材料及制品》中对食品接触用纸制品中氯.丙.醇的水提取量给出了严格的要求，而已有的研究表明，造纸化学品可能是纸制品中氯.丙.醇的重要来源之一，因此管控造纸化学品中氯.丙.醇的含量成为食品接触用纸的生产企业需要解决的一项重要任务。
造纸阶段用到的大量化学品中，可能会有部分化学品中含有来自于氯.丙.醇的氯.丙.醇残留，随着生产链的传递和食品接触用纸制品向所接触的食品发生迁移，氯.丙.醇可能终会随食品进入，影响消费者健康安全。
但我国对于造纸化学品中的氯.丙.醇尚缺乏相关检测方法标准，这给造纸企业及上游化学品生产企业管控造纸化学品中的氯.丙.醇带来困难。为弥补标准领域的这一不足，IQTC于2023年6月向食品工业协会提出了团体标准立项申请，并于2023年7月获得正式立项，总共有12家单位共同参与了为期一年的起草。
参编单位包括：济宁南天农科化工有限公司、四川洋淼环保科技有限公司、浙江传化华洋化工有限公司、杭州杭化哈利玛化工有限公司、广东良仕工业材料有限公司、珠海红塔仁恒包装股份有限公司、山东奥赛新材料有限公司、爱森（中.国）絮凝剂有限公司、索理思（上海）化工有限公司、广州海关技术中心、保世高（广州）贸易有限公司、食品工业协会食品接触材料。
标准主要内容
标准适用于检测造纸化学品中游离态氯.丙.醇的含量，涵盖湿强剂、粘缸剂、防油剂等多种化学品。通过直接稀释-气相色谱-质谱法和衍生化反应-气相色谱-质谱法两种方法，分别适用于不同含量级别的化学品，为造纸企业和上游化学品生产企业提供了科学的检测和管控方法。
本标准适用于造纸化学品中游离态氯.丙.醇含量的检测，包括但不限于湿强剂、粘缸剂、防油剂、消泡剂、涂布抗水剂、表面施胶剂、模塑防水剂、改性淀粉、改性松香、改性纤维素、改性树脂等。
标准采用两种方法对氯.丙.醇进行检测：
【方法一】直接稀释-气相色谱-质谱法
无需使用昂贵的同位素试剂进行衍生化反应，测试成本低廉、操作简便，适用于氯.丙.醇含量在ppm数量级的造纸化学品。
▲参考色谱图【方法一】
【方法二】衍生化反应-气相色谱-质谱法
通过衍生化反应提高检测灵敏度，检出限可低至0.01 mg/kg。
▲参考色谱图【方法二】
意义和影响
本标准的制定为造纸化学品生产企业做好产品中氯.丙.醇的管控、以及造纸企业做好原材料中氯.丙.醇的管控提供了科学的检测方法。这也将为下游纸制品企业生产的食品接触用纸和纸制品做好氯.丙.醇的合规提供重要的解决思路。
IQTC期待与各方开展更多高水平合作，为行业和相关部门提供更多高水平技术服务和解决方案。
以上内容转自“食品接触材料科学”公众号，原标题《造纸化学品中氯.丙.醇的测试方法团标发布》，此公众由我们总部FCM实验室运营。
我们总部FCM实验室可以做团体标准 T/CNFIA 206-2024氯.丙.醇含量的测试，有需求的企业，可以与我们联系。
联系人：邹工
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附 录 E
产品杀菌性能、性能与稳定性检测方法
E.6.6 振荡烧瓶试验
E.6.6.1 适用范围
适用于对含非溶出性物质的材料的性能检测。
注1：在进行振荡烧瓶试验前，需要鉴定其成分是否可溶出，如果有溶出性材料，参照可溶出材料检测；无溶出性材料，选用振荡烧瓶法进行。
注2：非溶出性材料的鉴定：将样品置于无菌蒸馏水浸泡 24 h（通过预试验，吸取的浸泡液需满足后续检测要求），取浸泡液参照 E.6.1 剂性能试验或参照 E.6.4 环试验检验是否有效果。如果无效果，说明样品属非溶出性材料，进行振荡烧瓶试验。
E.6.6.4 评价标准
E.6.6.4.1 各次试验阴性对照均应无菌生长。
E.6.6.4.2 不加样片组活菌计数在 1.0×10 4 CFU/片～9.0×10 4 CFU/片之间，且样品振荡前后平均菌落数差值在 10％以内，试验有效。
E.6.6.4.3 各次试验中，试验样片率与对照样片率的差值大于 26％，产品具有作用。
检测方法
7.1 生产过程卫生要求检测方法
7.1.1 生产环境卫生要求检测方法按照附录 A 要求执行。
7.1.2 初始污染菌检测方法按照附录 B 要求执行。
7.1.3 消毒效果检测评价方法按照附录 C 要求执行。
7.2 产品卫生要求检测方法
7.2.1 产品外观采用目测、鼻嗅的方法进行测定。
7.2.2 卫生巾、卫生护垫等吸水产品 pH 按 GB/T 8939 的方法进行测定，其他产品 pH 有相应测定标准的按相应标准的方法进行测定，无相应测定标准的按 WS/T 10009 的方法进行测定。
7.2.3 可迁移性荧光增白剂：卫生巾（护垫）按 GB/T 8939 的方法进行测定；纸尿裤分别按GB/T 28004.1、GB/T 28004.2 的方法进行测定；其他卫生用品按 GB/T 27741 的方法进行测定。
7.2.4 铅、砷、汞的检测按《化妆品安全技术规范》的方法进行测定。
7.2.5 产品残留量测试方法按照附录 D 要求执行。
7.2.6 产品杀菌性能、性能与稳定性测试方法按照附录 E 要求执行。
7.2.7 葡萄糖酸氯己定、醋酸氯己定按照 GB/T 26367 及国家有关标准中规定的方法进行测定；
2,4,4’﹘三氯﹘2’﹘二苯醚按照 GB/T 27947 及国家有关标准中规定的方法进行测定；苯扎溴铵、苯扎氯铵按 GB/T 26369 及国家有关标准中规定的方法进行测定；其他有效成分含量按照 WS/T 10009 及国家有关标准中规定的方法进行测定；无法使用化学测定法的不测定。
7.2.8 产品毒理学试验方法按照附录 F 要求执行。
7.2.9 产品微生物检测方法按照附录 B 要求执行。
附 录 B
产品微生物检测方法
B.4 铜绿假单胞菌检测方法
B.4.1 操作步骤
B.4.1.1 增菌培养：取样液 5.0 mL，加入到 50 mL SCDLP（Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate 简称）培养液中，充分混匀，置 36 ℃±1 ℃ 培养 18 h～24 h。如有铜绿假单胞菌生长，培养液表面呈现一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。
B.4.1.2 分离培养：从培养液的薄菌膜处挑取培养物，划线接种十六烷基三溴化铵琼脂平皿，置36 ℃±1 ℃ 培养 18 h～24 h，观察菌落特征。铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好，菌落扁平无定型，向周边扩散，或蔓延，表面湿润，菌落呈灰白色，菌落周围培养基常扩散有水溶性色素。在缺乏十六烷基三溴化铵琼脂时也可用胺培养基进行分离，将菌悬液划线接种于平皿上，放 36 ℃±1 ℃ 培养18 h～24 h，观察菌落特征。铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好，菌落扁平，边缘不整，菌落周围培养基略带粉红色。
B.4.1.3 染色镜检：取鉴定培养基上可疑菌落涂片作革兰染色，镜检为革兰阴性菌者还需进行下列试验。
B.4.1.4 氧化酶试验：取一小块洁净的白色滤纸片放在平皿内，用无菌玻棒挑取鉴定培养基上可疑菌落涂在滤纸片上，然后在其上滴加一滴新配制的 1％二对苯二胺试液，30 s 内出现粉红色或紫红色，为氧化酶试验阳性，不变色者为阴性。亦可使用商品化的氧化酶试纸或试剂进行检测。
B.4.1.5 绿脓菌素试验：取鉴定培养基上 2 个～3 个可疑菌落，分别接种在绿脓菌素测定用培养基斜面，36 ℃±1 ℃ 培养 24 h，加入三氯 3 mL～5 mL，充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解，待三氯呈蓝色时，用吸管移到另一试管中并加入 1.0 mol/L 的 1 mL，振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性，表示有绿脓菌素存在。
B.4.1.6 盐还原产气试验：取鉴定培养基上可疑菌落接种在盐胨水培养基中，置 36 ℃±1 ℃ 培养 24 h，培养基小倒管中有气者即为阳性。
B.4.1.7 明胶液化试验：取鉴定培养基上可疑菌落纯培养物，穿刺接种在明胶培养基内，置 36 ℃±1 ℃培养 24 h，取出放于 4 ℃～10 ℃，如仍呈液态为阳性，凝固者为阴性。
B.4.1.8 42 ℃ 生长试验：取鉴定培养基上可疑培养物，接种在普通琼脂斜面培养基上，置 42 ℃ 培养24 h～48 h，有铜绿假单胞菌生长为阳性。
B.4.1.9 其他检验：使用生化鉴定试剂或生化鉴定卡的，依据商品试剂说明书对可疑菌落进行鉴定。
B.4.2 结果报告
被检样品经增菌分离培养后，证实为革兰阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、盐还原产气和 42 ℃ 生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。
