模塑防水剂氯丙醇（两项）检测及检测实验室

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附　录　B
产品微生物检测方法
B.5　金黄色葡萄球菌检测方法
B.5.1　操作步骤
B.5.1.1　增菌培养：取样液 5.0 mL，加入到 50 mL SCDLP 培养液中，充分混匀，置 36 ℃±1 ℃ 培养18 h～24 h。
B.5.1.2　分离培养：自上述增菌悬液中取 1～2 接种环，划线接种 Baird Parker 培养基（）或血琼脂培养基，置 36 ℃±1 ℃ 培养 24 h～48 h。在 Baird Parker 培养基上为圆形，光滑，凸起，湿润，直径为2.0 mm～3.0 mm,颜色呈灰色到黑色，周围为一混浊带，在其外层有一透明带，用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶尔会遇到非脂肪溶解的类似菌落，但无混浊带及透明带。在血琼脂平皿上典型菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。
B.5.1.3　染色镜检：挑取典型菌落，涂片作革兰染色镜检，金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌，排列成葡萄状，无芽孢与荚膜。镜检符合上列情况，还需进行甘露醇发酵试验和血浆凝固酶试验。
B.5.1.4　甘露醇发酵试验：取血琼脂平皿上典型菌落接种甘露醇培养液，置 36 ℃±1 ℃ 培养 24 h，发酵甘露醇产酸者为阳性。
B.5.1.5　血浆凝固酶试验（试管法）：吸取 1:4 新鲜血浆或冻干血浆生理盐水溶液 0.5 mL，放小试管中，加入等量待检菌 24 h 肉汤培养物 0.5 mL，混匀，放 36 ℃±1 ℃ 温箱或水浴中，每 30 min 观察一次，24 h 之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各 0.5 mL 作为阳性与阴性对照。
B.5.1.6　其他检验：使用生化鉴定试剂或生化鉴定卡的，依据商品试剂说明书对可疑菌落进行鉴定。
B.5.2　结果报告
凡在琼脂平皿上有可疑菌落生长，镜检为革兰阳性呈葡萄状排列的球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。

附　录　E
产品杀菌性能、性能与稳定性检测方法
E.5.2　载体浸泡定量杀菌试验
E.5.2.1　适用范围
适用于黏稠状（半固体）产品如洗手液等对微生物效果的鉴定。
E.5.2.2　染菌载体制备
取试验菌 24 h 新鲜斜面培养物用 PBS 洗下，用 PBS 稀释至约 5.0×10 6 CFU/mL～5.0×10
CFU/mL 制成菌悬液备用。用微量移液器滴染 10 μL 菌悬液于载体上，35 ℃±1 ℃ 烘干或室温晾干备用。
E.5.2.3　中和剂鉴定试验
E.5.2.3.1　试验分组
第 1 组：5.0 mL 中和剂 + 染菌载体 → 培养。
第 2 组：（含剂的载体 + 5.0 mL 中和剂）+ 染菌载体→ 培养。
第 3 组：5.0 mL 稀释液 + 染菌载体→ 培养。
第 4 组：稀释液 + 中和剂 + 培养基 → 培养。
E.5.2.3.2　试验步骤
根据试验分组，准备试管和平皿，依次进行编号。
第 1 组：取 5.0 mL 中和剂于无菌平皿中，置 20 ℃±1 ℃ 水浴 5 min，加入 1 片染菌载体，作用10 min，取出菌片放入 5.0 mL 中和剂试管内，作用 10 min 后，置涡旋振荡器上振荡 1 min 或在手掌上用力振打 80 次，将试验菌洗下，用中和剂做 10 倍系列稀释后，选择适宜稀释度，分别吸取 1.0 mL 接种于2 个平皿中，做活菌培养计数。
第 2 组：取 5.0 mL 中和剂于无菌平皿内，加入 1 片沾有样品的载体，混匀，置 20 ℃±1 ℃ 水浴作用 10 min 制成中和产物。再用无菌镊子取 1 片染菌载体，浸于中和产物中作用 10 min 后，用无菌镊子取出染菌载体移入含 5.0 mL 中和产物试管中，作用 10 min，振荡，将试验菌洗下，用中和产物做 10 倍系列稀释,选适宜稀释度分别吸取 1.0 mL 接种于 2 个平皿中，做活菌培养计数。
第 3 组：取 5.0 mL PBS 于无菌平皿中，置 20 ℃±1 ℃ 水浴 5 min，加入 1 片染菌载体，作用 10 min，取出菌片放入 5.0 mL PBS 试管内，作用 10 min 后，振荡，将试验菌洗下，用 PBS 做 10 倍系列稀释, 选适宜稀释度分别吸取 1.0 mL 接种于 2 个平皿中，做活菌培养计数。
第 4 组：分别吸取稀释液（PBS）与中和剂各 1.0 mL 于同一无菌平皿内，倒入同批次的培养基15 mL～20 mL，培养观察。
E.5.2.3.3　结果判定
第 1 组、第 2 组和第 3 组有相似量试验菌生长，且菌量在 1.0×10 4 CFU/片～9.0×10 4 CFU/片。计算组间菌落数误差率［计算见公式（E.2）］，其组间菌落数误差率应不超过 15％。
第 4 组无菌生长，否则，说明试剂有污染，应更换的试剂重新进行试验。
试验 3 次，每次试验均应符合以上要求。

附　录　E
产品杀菌性能、性能与稳定性检测方法
E.6　产品性能试验
E.6.1　剂性能试验
E.6.1.1　适用范围
适用于液体剂对微生物效果的测定。
GB 15979-2024
25
E.6.1.2　试验步骤
取新鲜制备的菌悬液 0.5 mL 滴加于 4.5 mL 样液内，混匀后开始计时，作用至预定时间，用定量吸管吸取菌药混悬液 0.5 mL 放入 4.5 mL 稀释液的试管内，充分混匀，分别吸取 1.0 mL 接种平皿，每管接种 2 个平皿，将冷至 40 ℃～45 ℃ 熔化的营养琼脂培养基（细菌）或沙堡弱琼脂培养基（酵母菌），倾注于已加入样液的平皿中，每平皿 15 mL～20 mL，转动平皿，使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平皿，36 ℃±1 ℃ 培养 48 h（细菌）或 72 h（酵母菌），进行活菌菌落计数。试验同时用稀释液代替试样，进行平行试验，作为阳性对照，回收菌数为 1.0×10 4 CFU/mL～9.0×10 4 CFU/mL。
试验 3 次，计算率。
E.6.1.4　评价标准
各次试验率 Y 均大于或等于 50％到小于 90％之间，产品有作用；各次试验率均大于或等于 90％，产品有较强作用。
剂的长作用时间不应超过 5 min。



以下内容转自“食品接触材料科学”公众号，原标题《造纸化学品中氯.丙.醇的测试方法团标发布》，此公众由我们总部FCM实验室运营。
近日，由IQTC提出并推动立项的团体标准 T/CNFIA 206-2024 《造纸化学品中氯.丙.醇含量的测定 气相色谱-质谱法》已经由食品工业协会正式发布。标准已于2024年7月14日起正式实施。标准文本欢迎索阅。
立项背景
GB 4806.8-2022《食品安全国家标准 食品接触用纸和纸板材料及制品》对食品接触用纸制品中氯.丙.醇的水提取量设定了严格的要求，现有研究显示造纸化学品可能是其主要来源之一，因此控制其含量成为生产企业亟需解决的重要任务。
由IQTC牵头起草的GB 4806.8-2022《食品安全国家标准 食品接触用纸和纸板材料及制品》中对食品接触用纸制品中氯.丙.醇的水提取量给出了严格的要求，而已有的研究表明，造纸化学品可能是纸制品中氯.丙.醇的重要来源之一，因此管控造纸化学品中氯.丙.醇的含量成为食品接触用纸的生产企业需要解决的一项重要任务。
造纸阶段用到的大量化学品中，可能会有部分化学品中含有来自于氯.丙.醇的氯.丙.醇残留，随着生产链的传递和食品接触用纸制品向所接触的食品发生迁移，氯.丙.醇可能终会随食品进入，影响消费者健康安全。
但我国对于造纸化学品中的氯.丙.醇尚缺乏相关检测方法标准，这给造纸企业及上游化学品生产企业管控造纸化学品中的氯.丙.醇带来困难。为弥补标准领域的这一不足，IQTC于2023年6月向食品工业协会提出了团体标准立项申请，并于2023年7月获得正式立项，总共有12家单位共同参与了为期一年的起草。
参编单位包括：济宁南天农科化工有限公司、四川洋淼环保科技有限公司、浙江传化华洋化工有限公司、杭州杭化哈利玛化工有限公司、广东良仕工业材料有限公司、珠海红塔仁恒包装股份有限公司、山东奥赛新材料有限公司、爱森（中.国）絮凝剂有限公司、索理思（上海）化工有限公司、广州海关技术中心、保世高（广州）贸易有限公司、食品工业协会食品接触材料。
标准主要内容
标准适用于检测造纸化学品中游离态氯.丙.醇的含量，涵盖湿强剂、粘缸剂、防油剂等多种化学品。通过直接稀释-气相色谱-质谱法和衍生化反应-气相色谱-质谱法两种方法，分别适用于不同含量级别的化学品，为造纸企业和上游化学品生产企业提供了科学的检测和管控方法。
本标准适用于造纸化学品中游离态氯.丙.醇含量的检测，包括但不限于湿强剂、粘缸剂、防油剂、消泡剂、涂布抗水剂、表面施胶剂、模塑防水剂、改性淀粉、改性松香、改性纤维素、改性树脂等。
标准采用两种方法对氯.丙.醇进行检测：
【方法一】直接稀释-气相色谱-质谱法
无需使用昂贵的同位素试剂进行衍生化反应，测试成本低廉、操作简便，适用于氯.丙.醇含量在ppm数量级的造纸化学品。
▲参考色谱图【方法一】
【方法二】衍生化反应-气相色谱-质谱法
通过衍生化反应提高检测灵敏度，检出限可低至0.01 mg/kg。
▲参考色谱图【方法二】

意义和影响
本标准的制定为造纸化学品生产企业做好产品中氯.丙.醇的管控、以及造纸企业做好原材料中氯.丙.醇的管控提供了科学的检测方法。这也将为下游纸制品企业生产的食品接触用纸和纸制品做好氯.丙.醇的合规提供重要的解决思路。
IQTC期待与各方开展更多高水平合作，为行业和相关部门提供更多高水平技术服务和解决方案。

以上内容转自“食品接触材料科学”公众号，原标题《造纸化学品中氯.丙.醇的测试方法团标发布》，此公众由我们总部FCM实验室运营。
我们总部FCM实验室可以做团体标准 T/CNFIA 206-2024氯.丙.醇含量的测试，有需求的企业，可以与我们联系。
联系人：邹工